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細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠卵巢上皮細胞直銷 | T25m2 | CS-963901 |
大鼠卵巢上皮細胞【Rat Ovarian:Normal Ovarian Epithelial Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
PorcineOrexieceptor,OXRELISA試劑盒豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 六氫姜黃素 HPLC≥98% 5mg
PorcineOrexinB,OX-BELISA試劑盒豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羅旦梅交酯 HPLC≥98% 5mg
PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羅漢松黃酮 A. HPLC≥98% 5mg
Porcineoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 洛柯堿 HPLC≥98% 5mg
Porcinephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISA試劑盒豬0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 駱駝蓬堿 HPLC≥98% 5mg
Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA試劑盒豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 落葉松樹脂醇 HPLC≥98% 5mg
Porcineplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISA試劑盒豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 馬兜鈴內酰胺 FI HPLC≥98% 5mg
Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 馬桑寧內酯 HPLC≥98% 5mg
Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISA試劑盒豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 馬桑亭 HPLC≥98% 5mg
PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISA試劑盒豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 馬尾杉醇 C HPLC≥98% 5mg
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒 Rat lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit 千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷 Oroxyloside 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
英文名稱HumanNF-kBELISAKit人NF-kB規(guī)格:96T/48T 泮托拉唑鈉1.5水合物 Pantoprazole Sesquihydrate 質量規(guī)格:>98%,BR
動物組織羥脯氨酸(hydroxyproline)比色法定量檢測試劑盒20 泮托拉唑鈉1.5水合物(標準品) Pantoprazole Sesquihydrate 質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
α-bungarotoxin,α-BGTELISA試劑盒α-銀環(huán)蛇(α-BGT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (S)-10-羥基喜樹堿;10-羥基喜樹堿 (s)-10-hydroxycamptothecin 質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠前列腺素G/H合酶1(PTGS1)ELISA試劑盒 ,英文名: PTGS1 ELISA Kit 10-羥基喜樹堿(標準品) (s)-10-hydroxycamptothecin 質量規(guī)格:HPLC>98%,S構型,標準品
小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleIercellularAdhesionMolecule1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T 甘草素(消旋) Liquiritigenin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人復制蛋白A(RPA-70)試劑盒 Human RPA-70 ELISA Kit 芹糖甘草苷;甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷 Liquiritin apioside 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RatIerleukin27,IL-27ELISAKit大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹糖異甘草苷;異甘草苷芹糖 Isoliquiritin apioside 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
CDK2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 白屈菜紅堿(標準品) Chelerythrine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
MousemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/H-2ⅠELISA試劑盒小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T TAE684 NVP-TAE684 質量規(guī)格:>98%,選擇性的ALK抑制劑
大鼠卵巢上皮細胞直銷大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 羅漢果黃素 HPLC≥98% 10mg
大鼠血小板活化因子(PAF)試劑盒 Rat platelet activating factor,PAF ELISA KIT 羅漢果黃素 Grosvenorine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA檢測試劑盒RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T 羅漢果苷VI HPLC≥98% 20mg
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit 羅漢果苷IV HPLC≥98% 20mg
大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit 羅漢果苷III HPLC≥98% 20mg
大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein IIb,GPIIb ELISA Kit 羅漢果苷IIe HPLC≥95% 20mg
大鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 Rat Thrombopoietin,TPO ELISA kit 羅格列酮鹽酸鹽 rosiglitazone 質量規(guī)格:美國進口
大鼠血小板衍生生長因子A(PDGF-A)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor A,PDGF-A ELISA kit 羅格列酮堿(標準品) Rosiglitazone base 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit 羅格列酮堿 Rosiglitazone base 質量規(guī)格:>99.0%
大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit 羅格列酮(鉀鹽) Rosiglitazone (potassium salt) 質量規(guī)格:美國進口
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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