當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>原代細胞>> T25m2大鼠小腦顆粒細胞操作
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
產品名稱 | 大鼠小腦顆粒細胞操作 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963912 |
大鼠小腦顆粒細胞【Rat Brain: Normal Cerebellar Granule Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGP大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 妥布霉素(標準品) Tobramycin Base 質量規格:效價測定
Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 硫酸妥布霉素 Tobramycin Sulfate 質量規格:含量634μg/mg-739μg/mg,BR
Ratα1-microglobulin,α1-MG大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 硫酸妥布霉素(標準品) Tobramycin Sulfate 質量規格:效價測定
Ratα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 托萘酯 Tolnaftate 質量規格:>98%,USP30,BR
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GST大鼠α谷胱甘肽S轉移酶(α-GST)ELISA試劑盒規格:96T/48T 拓撲替康鹽酸鹽 Topotecan HCl 質量規格:>99.0%
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISA試劑盒大鼠α谷胱甘肽S轉移酶(α-GST)ELISA試劑盒規格:96T/48T 拓撲替康鹽酸鹽(標準品) Topotecan HCl 質量規格:HPLC>98%,標準品
Ratα-Glucosidase,a-Glu大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規格:96T/48T 托拉塞米 Torasemide 質量規格:>99%,USP32
Ratα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規格:96T/48T 曲沃前列素 Travoprost 質量規格:含>99.0%
Ratβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/M大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒規格:96T/48T 鹽酸曲唑酮 Trazodone HCl 質量規格:>98.5%,USP32,BR,可用于細胞培養
Ratβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISA試劑盒大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒規格:96T/48T 鹽酸曲唑酮(標準品) Trazodone HCl 質量規格:>98%,標準品
真菌/酵母細胞染色質沉淀分析(CHIP)*試劑盒(包括抗體)20 瓊脂粉 Agar 質量規格:FMB Grade
MouseBigEndothelin,BigETELISAKit小鼠大內皮素(BigET)ELISA試劑盒規格:96T/48T 三氟胸苷;三氟尿苷(TFT) Trifluridine; Trifluorothymidine 質量規格:>98%
小鼠葡萄糖轉運蛋白4(GL4)ELISA試劑盒 ,英文名: GL4 ELISA Kit 四水合輔羧酶;四水合硫胺焦酯 Cocarboxylase tetrahydrate 質量規格:>98%,BR
人維生素B12(VB12)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T 甲磺酸加替沙星 Gatifloxacin mesylate 質量規格:BR,加替沙星干品含量>78%
大鼠整合素α2(ITGA2)試劑盒 Rat iegrin alpha-2,ITGA2 ELISA kit 鹽酸哌羅匹隆 Perospirone 質量規格:>98%,BR
英文名稱HumanPIIIELISAKit人III型前膠原氨基端肽(PIII)規格:96T/48T 替拉扎明 Tirapazamine(SR259075; Win59075; SR4233) 質量規格:>98%
動物組織同還原酶1C(aldo-ketoreductase1C)活性比色法定量檢測試劑盒20 糊精;白糊精 Dextrin 質量規格:BR
ELISAKitPPAR-γ兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規格:48T/96T 鹽酸芐達明 Benzidamine HCl 質量規格:>98%,BR
小鼠葡萄糖轉運蛋白2(GL2)ELISA試劑盒 ,英文名: GL2 ELISA Kit 葡聚糖凝膠G-50;交聯葡聚糖G-50(中顆粒) Sephadex G-50 質量規格:分類范圍3×100000
人維生素K1(VK1)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T 葡聚糖凝膠G-50;交聯葡聚糖G-50(粗顆粒) Sephadex G-50 質量規格:分類范圍3×100000
大鼠小腦顆粒細胞操作大鼠孕酮受體(PROGR)試劑盒 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit 硫酸異帕米星 Isepamicine Sulphate 質量規格:含量≥670µg/mg
大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 Rat apolipoprotein A1,Apo-A1 ELISA Kit 硫酸亞鐵七水(AR) Iron(II) sulfate, heptahydrate 質量規格:AR,>99%
大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)試劑盒 Rat apolipoprotein A1 precursor,Pre-Apo-A1 ELISA kit 硫酸亞鐵銨六水 Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate 質量規格:>99%,BR
大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)試劑盒 Rat Apolipoprotein A5,apo-A5 ELISA Kit 硫酸亞鈦(>98%,BR) Titanium (III) sulfate 質量規格:>98%,BR
大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 Rat apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit 硫酸新霉素(標準品) Neomycin sulfate 質量規格:效價測定
大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)試劑盒 Rat apolipoprotein B-48,ApoB48 ELISA kit 硫酸新霉素 Neomycin sulfate 質量規格:≥600 I.U. /mg,USP,BR
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)試劑盒 Rat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit 硫酸鋅七水(AR) Zinc sulfate, heptahydrate 質量規格:>99.5%,AR
大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISA Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit 硫酸小諾霉素/硫酸小諾米星/硫酸沙加霉素 Micronomicin Sulfate 質量規格:含量≥590 µg/mg
大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA檢測試劑盒RatApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 96T/48T 硫酸小檗堿(標準品) Berberine hydrogen sulphate 質量規格:HPLC≥98%,標準品
大鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 Rat apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit 硫酸小檗堿 HPLC≥98% 20mg
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