大鼠腦動脈血管平滑肌細胞【Rat Heart: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】 產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Lipase人脂肪酶規(guī)格：48T/96T 硫酸軟骨素 HPLC≥98% 20mg

LMP-1人潛伏膜蛋白1規(guī)格：48T/96T 硫酸小檗堿 HPLC≥98% 20mg

LPL人脂蛋白脂酶規(guī)格：48T/96T 硫辛酸 HPLC≥98% 20mg

Lp-PL-A2人脂蛋脂酶A2規(guī)格：48T/96T 柳穿魚黃素 HPLC≥98% 20mg

LPS人脂多糖/內規(guī)格：48T/96T 龍膽苦苷 HPLC≥98% 20mg

Lp-α人脂蛋白α規(guī)格：48T/96T 龍膽山酮酚 HPLC≥98% 10mg

LTA人脂0壁酸規(guī)格：48T/96T 龍膽酸 HPLC≥98% 20mg

LTBP2人組織內轉化生長因子β結合蛋白2規(guī)格：48T/96T 龍血素A HPLC≥98% 20mg

LXA4人脂氧素A4規(guī)格：48T/96T 龍血素B HPLC≥98% 20mg

MAP-2人微管相關蛋白2規(guī)格：48T/96T 龍血素C HPLC≥98% 20mg
大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)試劑盒 Rat Tenascin-C,TN-C ELISA Kit 明膠  Gelatin  質量規(guī)格：藥用級,膠強度 ~240 g Bloom

英文名稱HumanCTX-IELISAKit人I型膠原C端肽規(guī)格：96T/48T Bacto酵母浸粉(BD原裝)  Yeast extract  質量規(guī)格：Bacto;BD212750

動物組織同還原酶1E(aldo-ketoreductase1E)活性比色法定量檢測試劑盒20 無水碳酸鈉   carbonate anhydrous  質量規(guī)格：AR,≥99.8%

ELISAKitLebtospira兔鉤端螺旋體IgG規(guī)格：48T/96T D-果糖  D-Fructose  質量規(guī)格：>99%,BR

小鼠葡萄糖60酸異構酶(GPI)ELISA試劑盒 ，英文名： GPI ELISA Kit 核黃素鈉水合物  Riboflavin 5'-monophosphate  salt hydrate  質量規(guī)格：核黃素73.0 ~79.0%

人合成酶(NOS)ELISA檢測試劑盒Humanniicoxidesyhase,NOSELISAKit 96T/48T 化乙錠溶液，10 mg/ml  EB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml  質量規(guī)格：>98%,BR

大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒 Rat mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit 核苷酸膠體染料  Green-DNA Dye,SYBR Green I  質量規(guī)格：BR

英文名稱Humangp130solublefragmeELISAKIT人gp130規(guī)格：96T/48T D-葡萄糖無水  D-Glucose  質量規(guī)格：>99.5%,分子生物學級

動物組織石蠟切片糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(ALCIANBLUE)染色試劑盒50 咪唑  Imidazole  質量規(guī)格：AR

ELISAKitCA兔兒茶酚胺規(guī)格：48T/96T L(+)-阿拉伯糖  L(+)-Arabinose  質量規(guī)格：>98%,BR
大鼠腦動脈血管平滑肌細胞操作大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒 Rat neuophil elastase,NE ELISA Kit 硫酸氫氯吡格雷 II型(標準品)  Clopidogrel Bisulfate  質量規(guī)格：>98%,標準品

大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA檢測試劑盒Ratneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit 96T/48T 硫酸氫氯吡格雷 II型  Clopidogrel Bisulfate  質量規(guī)格：含量97.0%-101.5%，II型

大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)試劑盒 Rat neuophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit 硫酸羥氯喹（標準品）  Hydroxychloroquine sulfate  質量規(guī)格：UV法溶出度檢查

大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA檢測試劑盒Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 96T/48T 硫酸羥基氯喹  Hydroxychloroquine Sulfate  質量規(guī)格：>98%

大鼠中性粒細胞趨化因子(CINC)試劑盒 Rat cytokine-induced neuophil chemoatacta,CINC ELISA Kit 硫酸鉛(>99%,BC)  Lead (II) sulfate  質量規(guī)格：>99%,BC

大鼠周期素依賴性激酶5(CDK5)試劑盒 Rat Cyclin Depende Kinase 5,CDK5 ELISA Kit 硫酸普拉鈉（標準品）  Dehydroepiandrosterone-3-sulfate  質量規(guī)格：含量測定

大鼠周脂素(Plin1/Peri/Plin)試劑盒 Rat Perilipin-1,Plin1/Peri/Plin ELISA kit 硫酸奈替米星(標準品)  Netilmicin Sulfate  質量規(guī)格：含量測定

大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)試劑盒 Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit 硫酸奈替米星  Netilmicin Sulfate  質量規(guī)格：≥595 µg/mg,BR

大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA檢測試劑盒RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISAKit 96T/48T 硫酸鈉十水(>99%,BC)   sulfate, decahydrate  質量規(guī)格：>99%,BC

大鼠轉化生長因子α(TGF-α)試劑盒 Rat ansforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit 硫酸錳一水(AR)  Manganous sulfate monohydrate  質量規(guī)格：AR,>99%
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。