大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞【Rat Skin: Normal Epidermal Keratinocytes】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠細(xì)胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA試劑盒 ，英文名： CK 18-M65 ELISA Kit 五肽胃泌素  Pentagastrin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA試劑盒 ，英文名： CYFRA21-1 ELISA Kit 肽YY，人  Peptide YY, Human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞膜表面球蛋白(SmIg)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIg 96T/48T 肽YY，犬，大鼠，小鼠，豬  Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞色素C(CYCS)ELISA試劑盒 ，英文名： CYCS ELISA Kit 磷脂酶A2激活肽  Phospholipase A2 ActivatingPeptide  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseCytochrome-C,Cyt-C 96T/48T 泡蛙肽  Physalaemin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒 ，英文名： Cyt-C ELISA Kit PKI-tide  PKI-tide  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅲ(COX3)ELISA試劑盒 ，英文名： COX3 ELISA Kit 血小板因子4  Platelet Factor 4 (58-70)(human)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞色素P450家族成員27B1(CYP27B1)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP27B1 ELISA Kit Pneumadin，人  Pneumadin (human)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞色素P450家族成員2B6(CYP2B6)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP2B6 ELISA Kit Pneumadin，大鼠  Pneumadin (rat)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細(xì)胞色素P450家族成員2E1(CYP2E1)ELISA試劑盒 ，英文名： CYP2E1 ELISA Kit 朊病毒肽（106-126），人  Prion Peptide (106-126),Human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
小鼠旁血小板溶蛋白(PPL)ELISA試劑盒 ，英文名： PPL ELISA Kit 多聚賴(lài)氨酸  Poly-L-lysine  質(zhì)量規(guī)格：BR

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit 96T/48T 司班80;司盤(pán)80  Span* 80  質(zhì)量規(guī)格：BR

大鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 Rat apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit 聚乙二醇1000  PEG 1000  質(zhì)量規(guī)格：分子量1000

英文名稱(chēng)HumanFASLELISAKit人FASL規(guī)格：96T/48T 胰蛋白胨(BD)  Tryptone  質(zhì)量規(guī)格：BD 211705

動(dòng)物組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50 丹磺酰氯  DNSCl, Dansyl chloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%

ELISAKitIL-17兔白介素17規(guī)格：48T/96T N-乙基順丁烯二  N-Ethylmaleimide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒 ，英文名： VCL ELISA Kit 碳酸氫鉀(AR)  Potassium bicarbonate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit 96T/48T 十二烷基磺酸鈉(BR)   dodecanesulfonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISA Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit 茶堿  Theophylline  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

英文名稱(chēng)HumanFASELISAKit人FAS規(guī)格：96T/48T 纖維素酶  Cellulase  質(zhì)量規(guī)格：>2000U/mg
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞價(jià)格等電聚焦蛋白電泳(IEF)2倍上樣緩沖液10毫升 靈芝酸I HPLC≥98% 20mg

等電聚焦蛋白電泳(IEF)標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)水緩沖液50毫升 靈芝酸H甲酯 HPLC≥95% 20mg

等電聚焦蛋白電泳(IEF)強(qiáng)化補(bǔ)水緩沖液50毫升 靈芝酸H HPLC≥95% 20mg

等位基因特異性表達(dá)分析試劑盒5 靈芝酸G(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ganoderic acid G   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

等位基因特異性表達(dá)分析試劑盒5 靈芝酸G HPLC≥98% 20mg

低分子蛋白標(biāo)準(zhǔn)樣100 靈芝酸F(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ganoderic acid F  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

低內(nèi)小量質(zhì)粒抽提試劑盒20/50 靈芝酸F HPLC≥98% 10mg

低鹽LB細(xì)菌培養(yǎng)液500毫升 靈芝酸DM HPLC≥95% 20mg

地塞米松細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測(cè)試劑盒20 靈芝酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ganoderic acid D  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

地生蘭(terresial)播種培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 靈芝酸D HPLC≥98% 10mg
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。