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蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法檢測試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 12:24:32瀏覽次數:166次

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貨號 GOY-01S6368
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商品屬性:

產品名稱

蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法檢測試劑盒

規格

50管/48樣

檢測方法

紫外分光光度法

貨號

GOY-01S6368

商品介紹:

測定意義

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相應的葡萄糖基低聚糖。此外,SP還能催化合成熊果苷,具有的美白效果,在化妝品工業中具有重要應用。

測定原理:

SP能夠以磷酸為受體,催化蔗糖產生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH,導致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率,即可計算SP活性。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、1mL石英比色皿和蒸餾水。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

二氧化硅 99.5%,15±5nm2-環己基溴乙烷 98%human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit  人甲狀腺激球蛋白

氧化鍶 AR4-溴芐氯 98%human Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit  人甲狀旁腺

氧化鍶 97%,5-8um(S)-(-)-1-(4-溴苯)乙 99%, ee 98%human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT  人甲肟前列腺素D2

 99.8%,60nm,銳鈦,親水1-溴-2-氟苯 98%human Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit  人高敏甲狀腺素

 99.8%,40nm,銳鈦,親水4-溴-2-氟苯甲 97%human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit  人高靈敏度促甲狀腺

納米 99.8%,40nm,金虹,親水1-溴-2-萘酚 98%human dopamine,DA ELISA KIT  人多巴

納米 99.8%,60nm,金虹3-溴喹啉 98%human Azidothymidine,AZT ELISA Kit  人苷

納米 99.8%,5-10nm,銳鈦,親水親油型1-溴-4-氯-2- 99%human adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit  人促皮質

蔗糖磷酸化酶(SP)紫外分光光度法檢測試劑盒鄰二酰亞 99%人類泛素蛋白ISG15 免疫試劑盒整合素αM/巨噬表面分子抗體phospho-P53(Ser392)  化腫瘤抑制因P53抗體

2-乙-3-吡 99%人類白抗原G(HLA-G)免疫試劑盒血小板內皮黏附分子-1抗體phospho-P53(Ser376)  化腫瘤抑制因P53抗體

2-乙-3-吡 ≥98%, FCC, Kosher, FG人類白抗原E(HLA-E)免疫試劑盒血小板內皮黏附分子1抗體phospho-P53(Ser37)  化腫瘤抑制因P53抗體

18-冠-6 99%人類白抗原B27(HLA-B27)免疫試劑盒CD34抗體phospho-P53(Ser33)  化腫瘤抑制因P53抗體

, 含穩定劑銅屑, 98%人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)免疫試劑盒CD36抗體phospho-P53(Ser315)  化腫瘤抑制因P53抗體

代異戊烷 97%人酪氨酰tRNA合成(YARS)免疫試劑盒凋亡加強結構域蛋白6抗體phospho-P53(Ser20)  化腫瘤抑制因P53抗體

乙烷 99%,含銅屑穩定劑人酪氨酰DNA 二酯1(TDP1)免疫試劑盒凋亡加強結構域蛋白17抗體phospho-P53(Ser15)  化腫瘤抑制因P53抗體

1-戊烷 98%,含穩定劑銅屑人酪氨羥化(TH)免疫試劑盒凋亡加強結構域蛋白4抗體Phospho-p40phox (Thr154)  化嗜中性粒胞漿因子4抗體

AR,99.5%人酪氨激2(Tyk-2)免疫試劑盒4號染色體開放閱讀框34抗體phospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182)  化絲裂原活化蛋白激p38抗體

代正丁烷 98%人酪氨蛋白激受體TYRO3(TYRO3)免疫試劑盒酪蛋白激1γ3/CKI γ3抗體phospho-p23 (Ser113)  化端粒結合蛋白P23抗體

1-烷 99%人蘭尼堿受體2(RYR2)免疫試劑盒凋亡加強結構域蛋白9抗體phospho-p107/RBL1(Ser975)  化視網膜母瘤樣蛋白p107抗體

 CP,95.0%(劇品)人蘭尼堿抗體免疫試劑盒膽固氧化抗體phospho-p107(Thr369)   化視網膜母瘤樣蛋白p107抗體

 AR,98.0%(劇品)人賴氨酰氧化免疫試劑盒半胱蛋白蛋白14抗體phospho-ODF2(Ser796)  化尾部結構蛋白抗體

三溴化 CP,98.0% 人賴氨特異性脫5A(JARID1A)免疫試劑盒半胱蛋白蛋白5抗體Phospho-Nur77(Ser351)  化孤兒核受體蛋白Nur77抗體

97%人醌NADH脫氫1(NQO1)免疫試劑盒豬瘟病抗體Phospho-Numb (Ser276)  化膜相關蛋白Numb抗體

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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