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NAD蘋果酸酶(NADME)微量法檢測試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 12:10:58瀏覽次數:237次

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貨號 GOY-01S6359
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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

NAD蘋果酸酶(NADME)微量法檢測試劑盒

100管/96樣

微量法

GOY-01S6359

商品介紹

測定意義

ME廣泛存在于微生物、培養細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應,產生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應,是蘋果酸代謝的關鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關。近年來植物ME活性測定較多,已經成為抗氧化研究的熱點。根據輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)

測定原理:

NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

間粘附分子-2抗原Anti-GRM4 Antibody小鼠過氧化氫(CAT)elisa定量檢測試劑盒

白介素1α/IL-1αAnti-GRK7 Antibody大鼠塔塔結合蛋白(TBP)elisa定量檢測試劑盒

血藍蛋白Anti-GRK6 Antibody大鼠TATA盒結合蛋白相關因子1(TAF1)elisa定量檢測試劑盒

Ki-67Anti-GRM3 Antibody大鼠干因子受體(SCFR)elisa定量檢測試劑盒

脂質運載蛋白Anti-GRM6 Antibody小鼠載脂蛋白A2(ApoA2)elisa定量檢測試劑盒

瘦素Anti-GRM6 Antibody大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2SRβ)elisa定量檢測試劑盒

偶聯牛血清白蛋白Anti-GSC Antibody小鼠成纖維生長因子受體1(FGFR1)elisa定量檢測試劑盒

與血藍蛋白偶聯物Anti-GSC2 Antibody小鼠鋅結合α2-糖蛋白1(AZGP1)elisa定量檢測試劑盒

NAD蘋果酸酶(NADME)微量法檢測試劑盒烯唑 分析標準品,99.5%大鼠C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒HEATR4蛋白抗體Goat Anti-human IgM/Bio  標記的羊抗人IgM

標準溶液 100μg/ml,u=4%大鼠CXC趨化因子受體5(CXCR5)免疫試劑盒透明質及粘蛋白1抗體Goat Anti-human IgM/APC  APC標記的羊抗人IgM

標準溶液 10μg/ml,u=6%(劇品)大鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)免疫試劑盒轉錄因子HES7抗體Goat Anti-human IgM/AP  堿性(AP)標記的羊抗人IgM

 分析標準品,99%(劇品)大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)免疫試劑盒宮頸黏液蛋白相關蛋白抗體Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的羊抗人IgM

標準溶液 100μg/ml,u=3%大鼠c-ros致癌因1,受體酪氨激(ROS1)免疫試劑盒流感病H3N8血凝素抗體Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgM

標準溶液 10μg/ml,u=6%大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)免疫試劑盒流感病H3N7血凝素抗體Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgM

乙拌標準溶液 100μg/ml,u=3%大鼠c-jun 免疫試劑盒流感病H3N1血凝素抗體Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的羊抗人IgM

乙拌標準溶液 10μg/ml,u=7% (劇品)大鼠c-fos 免疫試劑盒同源盒蛋白HoxB3抗體Goat anti-human IgM whole serum  羊抗人IgM抗血清

溴菊酯 分析標準品,99.5%(劇品)大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-3脂酰轉移,線粒體(PGS1)免疫試劑盒遺傳性血色病蛋白相關蛋白1抗體Goat Anti-human IgM  羊抗人IgM

溴菊酯標準溶液 100μg/ml,u=3%大鼠CDCP1 免疫試劑盒甘油吸收/轉運蛋白GUP1抗體Goat Anti-human IgG/RBITC  羅丹明標記的羊抗人IgG

溴菊酯標準溶液 10μg/ml,u=6% 大鼠CD8分子(CD8)免疫試劑盒HHIP蛋白抗體Goat Anti-human IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的羊抗人IgG

吡氟酰草 分析標準品,99.5%大鼠CD68分子(CD68)免疫試劑盒亞鐵氧化抗體Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的羊抗人IgG

草萘 分析標準品,95%大鼠CD63分子(CD63)免疫試劑盒鳥苷釋放因子p532蛋白抗體Goat Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的羊抗人IgG

除蟲脲標準溶液 100μg/ml,u=2%大鼠CD4分子(CD4)免疫試劑盒HERC2 E3泛素蛋白連接抗體Goat Anti-human IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的羊抗人IgG

除蟲脲標準溶液 10μg/ml,u=3%大鼠CD45分子(CD45)免疫試劑盒HERC3 E3泛素蛋白連接抗體Goat Anti-human IgG/PE  PE標記的羊抗人IgG

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